Primera identificación de Tyrophagus curvipenis (Acari: Acaridae) y detección de patógenos en colonias de Apis mellifera en la República de Corea

Scientific Reports volumen 13, Número de artículo: 9469 (2023) Citar este artículo

Detalles de métricas

Los ácaros del género Tyrophagus (Acari: Acaridae) se encuentran entre los ácaros más ampliamente distribuidos. Las especies de este género causan daños a los productos y cultivos almacenados y representan una amenaza para la salud humana. Sin embargo, la influencia de Tyrophagus spp. en la apicultura sigue siendo desconocido. En 2022, se realizó un estudio centrado en la identificación de especies de Tyrophagus dentro de cinco colmenares en la provincia de Chungcheongnam, República de Corea. Su objetivo específico fue investigar la presencia de ácaros Tyrophagus en respuesta a la alta mortalidad reportada de colonias de abejas melíferas en esta área. La identificación morfológica y el análisis filogenético utilizando la subunidad 1 (CO1) de la citocromo-c oxidasa del gen mitocondrial confirmaron por primera vez la presencia de la especie de ácaro Tyrophagus curvipenis en una colonia de abejas melíferas en la República de Corea. Se detectaron dos patógenos de abejas melíferas en el ácaro, un patógeno viral (virus del ala deformada, DWV) y un patógeno protozoario (Trypanosoma spp.). La presencia de los dos patógenos de las abejas melíferas en el ácaro sugiere que este ácaro podría contribuir a la propagación de enfermedades relacionadas con las abejas melíferas. Sin embargo, la influencia directa del ácaro T. curvipenis en la salud de las abejas melíferas sigue sin conocerse y debe investigarse más a fondo.

Las abejas melíferas (Apis mellifera) son polinizadores esenciales de cultivos y plantas silvestres y desempeñan un papel indispensable en la vida humana al proporcionar productos importantes como la miel, la jalea real y el propóleo. Sin embargo, la pérdida de colonias de abejas melíferas debido al cambio climático y la propagación de patógenos se ha producido en todo el mundo1,2,3. Una de las principales causas de muerte de las abejas melíferas son los ácaros como Varroa spp. y Tropilaelaps spp., que se alimentan de las abejas melíferas y son vectores de transmisión de enfermedades en las abejas melíferas4,5,6,7. La transmisión mediada por vectores aumenta significativamente la propagación de patógenos, lo que contribuye al colapso de la colonia de abejas infectadas. El reciente aumento en la tasa de pérdida de colonias de abejas melíferas se ha convertido en una gran preocupación para los apicultores e investigadores; la tasa de pérdida de colonias ha llegado al 36,5 % en muchos países8, y se informó una pérdida de aproximadamente el 37,7 % en 2018-2019 en los Estados Unidos9. En la República de Corea (ROK), el valor de la polinización de las abejas melíferas se ha estimado en 5900 millones de USD, lo que corresponde aproximadamente al 50 % del valor económico de la producción de frutas y hortalizas10; sin embargo, la pérdida de alrededor del 18% de las colonias de abejas melíferas en el país se debe a razones desconocidas11. Por lo tanto, es crucial identificar los factores que afectan negativamente a la apicultura en el país.

Los ácaros del género Tyrophagus se distribuyen en todo el mundo en una variedad de hábitats, que incluyen hospedantes naturales y antropogénicos, así como plantas y animales12,13,14. Varias especies de Tyrophagus dañan cultivos económicos como hortalizas de invernadero y flores ornamentales15,16. Tyrophagus pertenece al superorden Acariformes, familia Acaridae, e incluye aproximadamente 35 especies registradas globalmente12,17. Tyrophagus curvipenis (Acari: Acaridea) ha sido reportado en una variedad de huéspedes animales en Costa Rica y Rusia, 18 y en varias plantas en Nueva Zelanda, Francia, Australia y Portugal12. Fain y Fauvel reportaron por primera vez ácaros T. curvipenis aislados de estructuras de madera de un invernadero en Portugal, y19 registraron que los ácaros habitan ocasionalmente en las flores de las orquídeas y pueden alimentarse de su polen19. Se han identificado varias especies de Tyrophagus (como T. putrescentiae, T. curvipenis, T. tropicus, T. debrivorus, T. similis, T. longgior, T. mixtus, T. perniciosus, T. vanheurni y T. savasi). asociado con las abejas20. Tyrophagus putrescentiae (Acari: Acaridae) se detectó en muestras de abejas melíferas muertas21, en el cuerpo de abejorros22 y en colmenas de abejas melíferas en Brasil. Esto sugiere el potencial de los ácaros para dañar la salud humana al consumir los productos de las abejas melíferas contaminadas23. Ningún estudio informa la presencia de las nueve especies restantes de Tyrophagus en las abejas melíferas. Actuando como posibles portadores de patógenos o vectores de infecciones por patógenos, estos ácaros pueden afectar a los seres humanos indirectamente24,25,26; por lo tanto, el papel de T. curvipenis y otras especies de ácaros que infectan a las abejas melíferas necesita más estudios y evaluaciones.

La identificación de los ácaros Tyrophagus se ha basado tradicionalmente en la morfología12,14,27. Sin embargo, este método es laborioso debido al pequeño tamaño de los ácaros Tyrophagus, requiere una buena comprensión de los rasgos morfológicos y requiere mucho tiempo. El método molecular basado en el gen mitocondrial citocromo-c oxidasa subunidad 1 (CO1) y el espaciador transcrito interno ribosómico nuclear 2 (ITS2) se sugirió como una herramienta alternativa para la identificación de especies de ácaros microscópicos28.

La detección de los factores responsables de la pérdida de colonias de abejas melíferas se llevó a cabo en las colonias muertas recolectadas de las regiones con alto colapso de colonias informado en invierno. Aquí, se detectaron y recolectaron ácaros de colonias de abejas muertas en la República de Corea en 2022. Se analizaron las secuencias de CO1 e ITS2 para identificar las especies de ácaros. Además, también se identificaron los patógenos de las abejas melíferas transportados por el ácaro.

El examen microscópico de las muestras de abejas melíferas reveló la presencia de ácaros T. curvipenis dentro de sus cuerpos, con una tasa de infestación del 100 %. Los ácaros aislados de la colonia de abejas melíferas se asociaron con diferentes etapas de vida de las muestras de abejas melíferas recolectadas, a saber, las etapas de huevo, larva, ninfa y adulto (Fig. 1a-d). El género Tyrophagus exhibe una característica distintiva en los ácaros adultos, con su idiosoma de color blanquecino a semitransparente (Fig. 1d). La identificación de la especie de ácaro T. curvipenis Fain & Fauvel (Acari: Astigmata: Acaridae) se basó en las características de las hembras y los machos. Los ácaros hembra eran pequeños, pálidos, idiosomas de 415–451 µm (n = 2) de largo, 218–225 µm de ancho; quelíceros 82–86 µm; escudo prodorsal casi pentagonal, manchas oculares prominentes, 83–84 µm de largo, 86–84 µm de ancho; seta supracoxal (scx, 31–36 µm) delgada, con cuatro pectinaciones moderadas o cortas; Órgano de Grandjean en forma de dedo, su lóbulo basal con dos dientes espiniformes; setas histerosómicas c1, d1 y d2 relativamente más cortas que otras; c1 (34–42 µm) un poco más corto que d2 (35–47 µm), d1 (117–109 µm) aproximadamente 3,4 × la longitud de c1 y 2,6 × la longitud de d2; conducto espermatecal angosto, base del saco espermatecal en forma de r (Fig. 2a); placa coxal II ampliamente triangular, que se extiende distalmente más allá del ápice del apodema II, con 1/3 del margen posterior ligeramente cóncavo; tarso I ω1 delgado, cilíndrico y ligeramente ensanchado en el ápice, tarso II ω delgado, casi cilíndrico; setas ω y r del tarso IV setiforme (Fig. S1 complementaria).

Diferentes estadios de Tyrophagus curvipenis detectados en abejas melíferas (Apis mellifera). La identidad de los ácaros acaroides se determinó analizando las características morfológicas utilizando un microscopio de contraste de fase. Se presentan diferentes estados de vida del ácaro: huevo (a), larva (b), ninfa (c) y adulto (d).

Caracterización morfológica de Tyrophagus curvipenis. La identificación de los ácaros Tyrophagus se basó en la posición de las setas ve, la forma de las setas scx. (a) Hembra, la comparación del tamaño de las setas c1, d1 y d2 con la distancia entre estas setas y las setas posteriores, y la forma de la espermateca femenina, (b) Macho, edeago en forma de S y dos ventosas distribuidas uniformemente en tarso IV.

El macho era más pequeño que la hembra, idiosoma de 319 µm (n = 1) de largo, 196 µm de ancho. quelíceros 71 µm; manchas oculares, placas coxales I y II, y solenidios I ω1 y II ω como en hembra; aedeagus curvo en forma de S; dos retoños distribuidos uniformemente en el tarso IV (Fig. 2b).

La familia a la que pertenece esta especie se puede determinar en base a las características morfológicas observadas al microscopio. Aunque los rasgos morfológicos son muy útiles para la identificación inicial, distinguir con precisión la especie exacta puede ser un desafío. Para confirmar la identificación, se diseñaron pares de cebadores específicos de especie dirigidos al gen CO1 y las regiones del gen ITS2 de los ácaros Tyrophagus. Optimizamos con éxito las condiciones de reacción de PCR para amplificar los genes CO1 e ITS2. A continuación, las secuencias se determinaron mediante análisis de secuencias. La amplificación de las regiones CO1 e ITS2 de muestras de huevos y ácaros adultos produjo bandas con una longitud esperada de 379 y 500 pb, respectivamente (Fig. 3a). Las secuencias de las regiones amplificadas fueron 100% similares entre las muestras de adultos y huevos. La búsqueda de las secuencias de CO1 obtenidas en la base de datos GenBank (blast.ncbi.nlm.nih.gov) reveló una identidad de secuencia del 100 % con T. curvipenis originaria de Costa Rica (número de registro del NCBI: KY986270) y una similitud del 86,64 % con T. putrescentiae (número de registro de NCBI: MH262448). Las secuencias IST2 de T. curvipenis no están disponibles en la base de datos del NCBI, y la búsqueda de las secuencias aisladas de las muestras en la base de datos GenBank indicó la similitud más alta del 91,78 % con T. putrescentiae en China (número de registro del NCBI: GQ205623. 1). Además, se observó una banda no específica (alrededor de 1,7 kb de largo) en la amplificación de ITS2 de una muestra adulta (Fig. 3b). La banda inesperada se extrajo para la secuenciación. Sin embargo, el resultado no fue identificado debido al pobre resultado de la secuenciación.

Amplificación de las regiones CO1 e ITS2 de ácaros aislados de abejas melíferas. (a) producto de PCR de CO1, (b) producto de PCR de ITS2. Los productos de PCR se confirmaron en gel de agarosa al 1%. el carril M es una escalera de ADN de 100 pb; los carriles 1 y 2 son productos de PCR de las muestras de huevos y adultos, respectivamente. el carril "-" es un control negativo sin una plantilla de ADN. El tamaño del amplicón de la muestra de ADN se muestra en pares de bases (pb).

El análisis filogenético basado en las secuencias del gen CO1 colocó a la hermana del ácaro recolectada con el aislado AD2025 de T. curvipenis recolectado de un nido de pájaro en Costa Rica y ambos estaban en el mismo clado con T. curvipenis aislado de plantas (durazno y chayote) en Rusia y Costa Rica (Fig. 4).

Árbol filogenético de unión de vecinos basado en secuencias del gen CO1. El nombre de la especie, los números de accesión del NCBI y el origen de la accesión se dan para cada secuencia. El ácaro identificado en muestras de abejas melíferas en este estudio está en negrita.

La detección de patógenos de 15 muestras de abejas melíferas mostró que las muestras de abejas estaban infectadas con DWV, BQCV y Trypanosoma (Tabla complementaria S1). Por lo tanto, para identificar la posibilidad de infección por patógenos de abejas melíferas en los ácaros, realizamos la detección de patógenos utilizando ácidos nucleicos totales extraídos de los ácaros. Se detectaron dos patógenos de abejas melíferas (DWV y Trypanosoma) en huevos y muestras adultas del ácaro. Además, los dos patógenos estaban presentes en las muestras de abejas melíferas de las mismas colonias donde se recolectaron los ácaros. La identidad de los patógenos se confirmó mediante PCR en tiempo real de transcripción inversa (RT-qPCR), que produjo bandas de 199 pb y 276 pb para DWV y Trypanosoma, respectivamente (Figs. 5 y 6).

Detección del virus del ala deformada (DWV) a partir de muestras de abejas y ácaros. La detección positiva de DWV se identificó en las curvas de amplificación de RT-qPCR (a). Los resultados se confirmaron visualizando la banda esperada (199 pb de longitud) en gel de agarosa (b). El carril M es un marcador de ADN de 100 pb. Los carriles 1 y 2 son bandas amplificadas a partir de muestras de huevos y adultos de Tyrophagus curvipenis, respectivamente. Los carriles 3 y 4 indican los resultados de muestras de abejas recolectadas de dos colonias. El carril "-" es el control negativo sin molde de ADN, y el carril '+' es el control positivo que usa ADN recombinante de DWV.

Detección de Trypanosoma a partir de muestras de abejas y ácaros. La detección positiva de Trypanosoma en PCR en tiempo real (a) se confirmó con la banda esperada (276 pb) en electroforesis en gel de agarosa (b). Los carriles 1 y 2 indican los resultados de la detección de muestras de huevos y adultos de T. curvipenis, respectivamente. Los carriles 3 y 4 son el resultado de la detección de Trypanosoma a partir de muestras de abejas recolectadas de dos colonias diferentes. La línea '-' es el control negativo sin molde de ADN y la línea '+' es el control positivo que utiliza ADN recombinante de Trypanosoma.

En este estudio, se detectaron e identificaron ácaros Tyrophagus en las colonias de cinco colmenares en Gongju, provincia de Chungcheongnam, República de Corea. Este es el primer reporte de T. curvipenis en colonias de A. mellifera en el país. La identificación morfológica y genética usando el gen CO1 reveló que el ácaro pertenece a la especie T. curvipenis, y el análisis filogenético de la secuencia obtenida indicó una estrecha relación entre el T. curvipenis de la República de Corea y el aislado de un nido de pájaro en Costa Rica (Fig. 4). Además, la filogenia de la especie de Tyrophagus basada en la similitud de nucleótidos en la región del gen CO1 mostró que la T. curvipenis detectada en la abeja melífera en este estudio estaba en el mismo grupo que la identificada en plantas como el durazno y el chayote de Rusia y Costa Rica. . El resultado sugiere que la fuente de T. curvipenis identificada en este estudio podría ser una flor visitada por la abeja melífera para recolectar polen y néctar. Cuatro de las 35 especies identificadas en el género Tyrophagus han sido reportadas hasta la fecha en la República de Corea: T. putrescentiae, T. similis, T. neiswanderi y T. longior29,30,31. Tyrophagus curvipenis reportado aquí es, por lo tanto, una especie registrada recientemente en la República de Corea. Al igual que otras especies, T. curvipenis se ha encontrado en colmenas de abejas melíferas en Nueva Zelanda32. Se informó que T. putrescentiae en Corea (Wanju-gun, Jeonnam) habita colmenas y se alimenta de desechos y polen33. Sin embargo, se desconoce la relación entre la salud de las abejas melíferas y la presencia del ácaro T. curvipenis en la colmena.

El método molecular se utilizó con éxito para identificar especies de Tyrophagus. El resultado del método molecular basado en la secuencia del gen CO1 fue consistente con la identificación basada en características morfológicas. Sin embargo, debido a la disponibilidad limitada de secuencias de Tyrophagus en la base de datos del NCBI, no se pudo confirmar la identificación de especies del ácaro Tyrophagus utilizando la región IST2. Además, el par de cebadores IST2 amplificó una banda no específica usando el ADN total extraído de ácaros adultos (Fig. 3b). El gen CO1, debido a una base de datos de secuencias depositada más grande, es potencialmente más beneficioso para la identificación de especies de ácaros Tyrophagus.

La infestación de abejas melíferas con ácaros que se alimentan de hemolinfa como Varroa y Tropilaelaps aumentó la pérdida de colonias durante la temporada de invierno y la transmisión de enfermedades de las abejas melíferas4,6,7,34,35,36. Se han demostrado los patógenos virales, bacterianos y fúngicos de las abejas melíferas alojados y transmitidos por los ácaros Varroa y Tropilaelaps36,37. El ácaro T. curvipenis detectado en este estudio dio positivo para un patógeno viral de abejas melíferas (DWV) y un patógeno protozoario (Trypanosoma). La infección con estos patógenos debilita la colonia y aumenta la mortalidad invernal de las abejas melíferas38,39,40. Además, estos patógenos se detectaron en las muestras de abejas melíferas donde se recolectaron los ácaros, lo que sugiere una alta posibilidad de que los ácaros transmitan dichos patógenos en las colmenas. Además, los ácaros Tyrophagus, comúnmente conocidos como ácaros de almacenamiento, se alimentan del moho que se encuentra en los alimentos41,42. Sin embargo, las fuentes de alimento de T. curvipenis en las colmenas de abejas siguen sin conocerse. Por lo tanto, comprender la influencia del ácaro T. curvipenis en las abejas melíferas ayudaría a desarrollar métodos apropiados para la prevención y el control de los ácaros. Además, es necesario minimizar los efectos potenciales de los ácaros en los humanos que consumen los productos de las abejas recolectados de las colonias infestadas, ya que algunos ácaros Tyrophagus fueron identificados como alérgenos en animales y humanos43,44. Con una tasa de infestación observada del 100% y el potencial de servir como vectores intermedios de enfermedades dentro de las colonias de abejas melíferas en los cinco colmenares estudiados, los ácaros Tyrophagus potencialmente juegan un papel importante en las pérdidas de colonias observadas. Los hallazgos de este estudio tienen el potencial de contribuir al desarrollo de estrategias de gestión dirigidas a minimizar el impacto de la infestación de ácaros Tyrophagus en la salud de las abejas melíferas y mejorar las tasas generales de supervivencia de las colonias. Al comprender la importancia de los ácaros Tyrophagus como contribuyentes potenciales al declive de las colonias, se pueden implementar medidas proactivas para mitigar sus efectos negativos y salvaguardar el bienestar de las poblaciones de abejas melíferas.

Este es el primer registro de ácaros T. curvipenis en colonias de abejas melíferas en la República de Corea, y este estudio demostró la presencia de patógenos de abejas melíferas (DWV y Trypanosoma) en ácaros. El resultado sugiere que el ácaro podría tener un papel importante en la propagación de los patógenos de las abejas melíferas. Sin embargo, en este estudio no se ha confirmado si el ácaro T. curvipenis contribuyó a la muerte de las colonias de abejas melíferas; por lo tanto, se necesitan más estudios para comprender la influencia de este enemigo y vector biológico de los patógenos de las abejas melíferas en la apicultura, y para revelar el riesgo potencial de los ácaros para los humanos que consumen los productos recolectados de las colonias de abejas melíferas infestadas.

Se recolectaron muestras de abejas melíferas de colonias muertas en colmenares en Gongju-si, provincia de Chungcheongnam, República de Corea, en noviembre de 2022. Se recolectaron un total de 45 muestras de abejas melíferas de 15 colonias en cinco colmenares diferentes para el examen de ácaros. La presencia de ácaros se confirmó bajo un microscopio de disección. Los ácaros se recogieron de la superficie del cuerpo y del pelo de las abejas melíferas. Los ácaros se montaron en portaobjetos con medio de Hoyer. Los especímenes fueron identificados y medidos según Fan y Zhang12. Todas las medidas utilizadas aquí están en micrómetros. Después de la identificación de las especies, los ácaros se utilizaron para el análisis genético y la detección de patógenos.

Las muestras de abejas melíferas y los ácaros recolectados se lavaron tres veces con agua destilada UltraPure™ (Invitrogen, EE. UU.) y se usaron para la extracción total de ácidos nucleicos. Se usó el kit de purificación de ácido nucleico total viral Maxwell RSC (Promega, EE. UU.) para la extracción de ácido nucleico de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Los ácidos nucleicos extraídos se utilizaron para la detección de patógenos de abejas melíferas. La extracción del ADN genómico del ácaro (ADNg) se realizó utilizando un kit QIAamp DNA Mini (Qiagen, Reino Unido) de acuerdo con las instrucciones del fabricante con algunas modificaciones45. Se agruparon diez ácaros adultos o cuatro huevos de ácaros recogidos de cada colonia de abejas melíferas y se colocaron en un tubo de 1,5 ml que contenía 200 µl de tampón ATL y perlas de acero de 2,381 mm (Hanam, República de Corea). Después de homogeneizar a 5000 rpm durante 15 s, se añadieron 20 µL de proteinasa K (50 µg/mL) y la mezcla se incubó a 56 °C durante 1 h. Se añadieron exactamente 200 µL de tampón de lisis a la solución y la solución se incubó durante 10 min a 70 °C. A continuación, se añadieron 200 µL de etanol al 98 % y la mezcla se mezcló mediante agitación vorticial. La solución se transfirió a la minicolumna giratoria AIAamp y se centrifugó a 12.000 xg durante 1 min. Después de lavar la columna de centrifugación dos veces con el tampón de lavado, el ADN genómico de los ácaros se eluyó en un tubo nuevo usando el tampón de elución y se centrifugó a 12 000 xg durante 2 min. El ADN aislado se utilizó para la amplificación por PCR de las regiones CO1 e ITS2.

Las muestras de ácaros y abejas melíferas de cada colonia se analizaron para detectar la presencia de patógenos de abejas melíferas utilizando el ácido nucleico total de las muestras de abejas melíferas y ácaros. Los patógenos de las abejas melíferas objeto de detección incluyeron loque americana (AFB), loque europea (EFB), Ascosphaera apis (ASCO), Aspergillus flavus (ASP), Nosema, Acarapis woodi (ACAR), Apocephalus borealis (PHORID), Sacbrood virus (SBV) ), DWV, virus de la célula reina negra (BQCV), virus de la parálisis crónica de la abeja (CBPV), virus de la abeja de Cachemira (KBV), virus de la parálisis aguda de la abeja (ABPV), virus de la parálisis aguda israelí (IAPV), virus filamentoso de Apis mellifera (AmFV), clados del virus del lago Sinaí (LSV1, LSV2, LSV3, LSV4), Trypanosoma, virus Varroa destructor-1 (VDV-1; DWV-B) y virus recombinante del ala deformada-virus Varroa destructor-1 (DWV-VDV-1) . La detección de patógenos se realizó en muestras de abejas melíferas utilizando kits RT-qPCR (LiliF ABPV/KBV/IAPV/CBPV Real-time RT-PCR Kit, LifiF SBV/KSBV/DWV/BQCV Real-time RT-PCR Kit [iNtRON Biotechnology, Inc., República de Corea], kit de detección de patógenos de abejas Pobgen [Postbio, República de Corea] y kit de un solo paso verde iTaq Universal SYBR [Bio-Rad, EE. UU.]). Los cebadores utilizados para la detección de patógenos de abejas melíferas se presentan en las tablas complementarias S2 y S3. Los patógenos detectados en las muestras de abejas melíferas se seleccionaron para la detección en muestras de ácaros utilizando los kits de PCR.

Las regiones CO1 e ITS2 de los ácaros se amplificaron utilizando conjuntos de cebadores universales CO1 directo (5ʹ-GTTTTGGGATATCTCTCATAC-3ʹ) y CO1 inverso (5ʹ-GAGCAACAACATAATAAGTATC-3ʹ)46; e ITS2-adelante (5ʹ-CGACTTTCGAACGCATATTGC-3ʹ) e ITS2-reversa (5ʹ-GCTTAAATTCAGGGGGTAATCTCG-3ʹ)47. Cada mezcla de reacción (20 µl) estaba compuesta por 20 ng de molde de gDNA, 1 µl de cada cebador (10 pmol), premezcla y mezcla maestra AccuPower® PCR (Bioneer, Corea) y ddH2O (para completar hasta 20 µl). El protocolo del termociclador PCR se optimizó de la siguiente manera: 94 °C (5 min); 5 ciclos de 94 °C (20 s), 52 °C (30 s) y 68 °C (30 s); seguido de 5 ciclos de 94 °C (20 s), 50 °C (30 s) y 68 °C (30 s); 30 ciclos de 94 °C (20 s), 48 °C (30 s), 68 °C (30 s); y los 30 ciclos finales de 94 °C (20 s), 46 °C (30 s), 68 °C (30 s); y el paso de extensión final a 68 °C (5 min). Después de confirmar las bandas de CO1 (379 pb) e ITS2 (500 pb) mediante electroforesis en gel de agarosa, las bandas se extrajeron y purificaron utilizando un kit de extracción de gel QIAquick (Qiagen). Los productos de PCR purificados fueron secuenciados por Cosmogenetech Co, Ltd. (ROK).

Las secuencias de nucleótidos identificadas de diferentes muestras de huevos y adultos se sometieron a una búsqueda BLASTn en la base de datos de nucleótidos del NCBI. Las secuencias de nucleótidos se alinearon utilizando el software BioEdit y Cluster W48,49. El árbol filogenético basado en la secuencia de CO1 se creó utilizando el método de unión de vecinos con 1000 replicaciones de arranque50 en el software MEGA751.

Todos los datos generados o analizados durante el estudio actual están disponibles en el repositorio del Centro Nacional de Información Biotecnológica (NCBI), número de acceso: OQ121480 (ITS2) y OQ121363 (CO1).

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Descargar referencias

Nos gustaría agradecer a los apicultores por proporcionar las muestras de ácaros. Agradecemos especialmente al Dr. Heung Shik Lee, al Dr. Nyen Gi Jung y al Dr. Ju Haeng Hur por sus valiosos comentarios sobre este trabajo. También agradecemos a Se Jeong Ahn, del Laboratorio de enfermedades parasitarias y de abejas melíferas, por la ayuda con la recolección de ácaros y el trabajo microscópico. Este trabajo fue apoyado por la Agencia de Cuarentena Animal y Vegetal, la República de Corea (Número de subvención M-1543081-2022-24-02).

Estos autores contribuyeron por igual: Thi-Thu Nguyen, Mi-Sun Yoo y A-Tai Truong.

Laboratorio de enfermedades parasitarias y de las abejas melíferas, División de enfermedades bacterianas, Departamento de investigación de salud animal y vegetal, Agencia de cuarentena animal y vegetal, Centro para el control de enfermedades de las abejas melíferas, 39660, Gimcheon, República de Corea

Thi-Thu Nguyen, Mi-Sun Yoo, A-Tai Truong, So Youn Youn, Se-Ji Lee, Dong-Ho Kim, Soon-Seek Yoon y Yun Sang Cho

División de Control de Plagas de Plantas, Departamento de Cuarentena de Plantas, Agencia de Cuarentena de Plantas y Animales, Gimcheon, 39660, República de Corea

Jong Ho Lee

Facultad de Biotecnología, Universidad de Ciencias Thai Nguyen, Thai Nguyen, Vietnam

A-Tai Truong

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Correspondencia a Yun Sang Cho.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Reimpresiones y permisos

Nguyen, TT., Yoo, MS., Truong, AT. et al. Primera identificación de Tyrophagus curvipenis (Acari: Acaridae) y detección de patógenos en colonias de Apis mellifera en la República de Corea. Informe científico 13, 9469 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-36695-z

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Recibido: 09 marzo 2023

Aceptado: 08 junio 2023

Publicado: 10 junio 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-36695-z

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